Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Evi-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404112
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Evi-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Evi-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Evi-1 Anticorpo (H-8): sc-515456
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Evi-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404112 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O MECOM codifica o fator de transcrição Evi-1, uma proteína com dedos de zinco que se liga ao DNA e regula programas de expressão gênica que controlam a manutenção de células-tronco e progenitoras hematopoéticas, o comprometimento de linhagem e a diferenciação celular. O Evi-1 participa de redes transcricionais e epigenéticas que se interconectam com a sinalização TGF-β/SMAD, as vias PI3K–AKT e o remodelamento de cromatina para modular a proliferação e a sobrevivência. A atividade desregulada de MECOM/Evi-1 é frequentemente associada a neoplasias hematológicas, nas quais o controle transcricional alterado contribui para autorrenovação aberrante e diferenciação prejudicada. Além do desenvolvimento do sangue, o MECOM tem sido implicado em processos de desenvolvimento e em circuitos transcricionais oncogênicos relevantes para transformação e fenótipos metastáticos em múltiplos contextos teciduais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Evi-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MECOM em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MECOM, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MECOM na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Evi-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MECOM para a investigação da sinalização de Evi-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MECOM críticos para a função Evi-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MECOM para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Evi-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Evi-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MECOM. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Evi-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Evi-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MECOM para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MECOM definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.