Estrogen Receptor beta Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400213-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Estrogen Receptor betaO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Estrogen Receptor beta (h) e o Plasmídeo Double Nickase Estrogen Receptor beta (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ESR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Estrogen Receptor beta Anticorpo (B-3): sc-373853
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Estrogen Receptor beta Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Estrogen Receptor beta Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ESR2 humano codifica o receptor de estrogênio beta (ERβ), um receptor nuclear ativado por ligante que regula programas transcricionais que controlam a proliferação celular, a diferenciação, a apoptose e a modulação imunológica em resposta a estrogênios e ligantes relacionados. O ERβ atua por meio de elementos clássicos de resposta a estrogênio e de interações “tethered” com fatores de transcrição, integrando sinalização pelas vias MAPK/PI3K-AKT e remodelamento de cromatina para moldar a expressão gênica de maneira dependente do contexto. Em muitos tecidos, o ERβ contrabalança a transcrição dirigida por ERα e contribui para a homeostase epitelial, a função mitocondrial e a sinalização inflamatória. A atividade desregulada de ESR2 ou a expressão alterada de ERβ tem sido associada a cânceres hormônio-responsivos, fenótipos reprodutivos e metabólicos e processos neuroinflamatórios, tornando-o um alvo central para estudos mecanísticos da sinalização por estrogênios.
Estrogen Receptor beta O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ESR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ESR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ESR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ESR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.