Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ESET Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401325-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ESETO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ESET (h) e o Plasmídeo Double Nickase ESET (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SETDB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ESET Anticorpo (A-1): sc-166621
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ESET Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401325-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ESET Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401325-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SETDB1 (ESET) é uma metiltransferase de histonas que contém um domínio SET e catalisa a trimetilação de H3K9, promovendo a formação de heterocromatina e uma repressão transcricional estável. Atua em programas epigenéticos de silenciamento gênico que regulam a especificação de linhagens, o controle do ciclo celular e a manutenção da integridade do genoma, incluindo a repressão de elementos repetitivos e retrotransposons. SETDB1 coopera com complexos KRAB–ZFP/KAP1 e outros reguladores de cromatina para moldar estados de cromatina repressivos e influenciar respostas a danos no DNA. A atividade desregulada de SETDB1 e alterações na paisagem de H3K9me3 têm sido associadas a programas transcricionais aberrantes e instabilidade genômica observados em múltiplos contextos relevantes para doenças.
ESET O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SETDB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SETDB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SETDB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SETDB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.