Plasmide Double Nickase (h) Erg-1/2/3: sc-400404-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Erg-1/2/3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Erg-1/2/3 Double Nickase (h) et le plasmide Erg-1/2/3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ERG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Erg-1/2/3 Antibody (D-3): sc-271048
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Erg-1/2/3 | sc-400404-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Erg-1/2/3 | sc-400404-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERG code le facteur de transcription de la famille ETS Erg-1/2/3, un régulateur nucléaire de programmes génétiques contrôlant l’homéostasie endothéliale, la différenciation hématopoïétique et la migration cellulaire. ERG intègre des signaux issus des voies associées à MAPK/ERK et PI3K/AKT afin de moduler des réseaux transcriptionnels impliqués dans le développement vasculaire, les réponses inflammatoires et la spécification des lignages. Une activité d’ERG dérégulée est associée à une reprogrammation transcriptionnelle oncogénique, notamment via des fusions de gènes ETS et une expression aberrante dans les leucémies et le cancer de la prostate, ce qui en fait un nœud central pour l’étude des mécanismes pathologiques pilotés par des facteurs de transcription. L’étude expérimentale d’ERG soutient la recherche sur la régulation génique dépendante de la chromatine, l’utilisation des enhancers et le contrôle, contextuel, de la prolifération et de la différenciation.
Erg-1/2/3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ERG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ERG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ERG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ERG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.