ERdj4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410882-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERdj4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ERdj4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ERdj4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DNAJB9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERdj4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERdj4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DNAJB9 humano codifica a ERdj4, uma co-chaperona Hsp40/DnaJ luminal do retículo endoplasmático (RE) que atua em parceria com a BiP/HSPA5 para promover o dobramento de proteínas e reforçar o controle de qualidade no RE. A ERdj4 participa da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) e da degradação associada ao RE (ERAD), sustentando a proteostase ao reconhecer proteínas‑cliente mal dobradas e facilitar seu processamento durante o estresse do RE. Por meio dessas vias, o DNAJB9 ajuda a regular a maturação de proteínas secretórias e a adaptação celular ao estresse proteotóxico, processos implicados em doenças caracterizadas por agregação proteica anormal e sinalização crônica de UPR. Alterações na expressão de DNAJB9/ERdj4 têm sido relatadas em contextos de estresse celular e vêm sendo usadas como leitura molecular em estudos que relacionam a proteostase no RE à disfunção inflamatória e metabólica.
ERdj4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DNAJB9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DNAJB9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DNAJB9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DNAJB9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.