ErbB3/HER3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420219

概要

Erbb3 は受容体型チロシンキナーゼである ErbB3/HER3 をコードしており、EGFR/ErbB ファミリーの一員として、増殖因子シグナルを伝達するために ERBB2 と優先的にヘテロ二量体を形成します。固有のキナーゼ活性は限定的であるにもかかわらず、ErbB3 は PI3K のための複数のドッキング部位を提供し、リガンド刺激を PI3K–AKT シグナル伝達へ強力に結び付けます。さらに MAPK/ERK や mTOR により制御されるプロセスへのクロストークも示します。マウス細胞では、ErbB3 は発生および組織恒常性のプログラムに寄与し、受容体トラフィッキングやフィードバック制御を介して上皮の分化、生存、遊走に影響を与えます。HER3 を含む ERBB シグナルの破綻は、がん原性受容体ネットワークの再編成や耐性様のシグナル適応の文脈でしばしば研究されており、Erbb3 は経路解析における一般的な結節点となっています。

ErbB3/HER3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるErbb3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Erbb3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Erbb3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ErbB3/HER3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ErbB3/HER3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Erbb3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ErbB3/HER3の機能に不可欠なErbb3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Erbb3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ErbB3/HER3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびErbB3/HER3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Erbb3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ErbB3/HER3 HDRプラスミド（m）および ErbB3/HER3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはErbb3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のErbb3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。