Epidermis-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410534-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Epidermis-type 12-LOO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Epidermis-type 12-LO (h) e o Plasmídeo Double Nickase Epidermis-type 12-LO (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ALOX12B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Epidermis-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410534-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Epidermis-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410534-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALOX12B codifica a 12-lipoxigenase do tipo epidérmico (12R-LO), uma dioxigenase de ferro não heme que oxigena o ácido araquidónico esterificado em lípidos epidérmicos para gerar intermediários hidroperóxidos usados na sinalização lipídica especializada. Esta atividade sustenta a diferenciação dos queratinócitos e a formação da barreira de permeabilidade do estrato córneo, através de vias coordenadas de remodelação lipídica que envolvem enzimas de processamento a jusante nas redes de hepoxilina e de oxilipinas relacionadas. A função de ALOX12B está intimamente ligada à montagem do envelope cornificado e à homeostase epidérmica, e a sua perturbação genética está associada a perturbações da queratinização e a defeitos de barreira. Por isso, ALOX12B é amplamente estudado em modelos de desenvolvimento epidérmico, biologia inflamatória da pele e metabolismo de mediadores lipídicos.
Epidermis-type 12-LO O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ALOX12B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ALOX12B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ALOX12B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ALOX12B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.