Epidermis-type 12-LO CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419088

개요

Alox12b는 표피형 12-리폭시게네이스(12-LO)를 암호화하는 유전자로, 비헴 철(iron)에 의존하는 디옥시게네이스이며 에스터화된 다불포화지방산을 산화해 하이드로퍼옥시 지질 중간체를 생성합니다. 마우스 표피에서 ALOX12B는 아실세라마이드 처리와 각질층(stratum corneum) 지질 장벽 형성을 뒷받침하는 리폭시게네이스 경로에서 기능하며, 케라티노사이트의 말기 분화와 각질화(cornification)를 조율합니다. 12-LO 활성의 변화는 표피 지질 항상성, 산화 지질 신호전달, 그리고 장벽의 완전성에 영향을 미치며, 이러한 과정은 어류증(ichthyosis) 유사 표현형, 피부염, 염증성 피부 스트레스 모델에서 흔히 연구됩니다. 따라서 Alox12b는 상피 장벽 기능과 피부 면역 신호전달에 대한 지질 대사 기여를 규명하기 위한 유용한 출발점이 됩니다.

Epidermis-type 12-LO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Alox12b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Alox12b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Alox12b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Epidermis-type 12-LO 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Epidermis-type 12-LO 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Alox12b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Epidermis-type 12-LO 기능에 중요한 Alox12b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Alox12b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Epidermis-type 12-LO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Epidermis-type 12-LO CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Alox12b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Epidermis-type 12-LO HDR 플라스미드 (m) 및 Epidermis-type 12-LO HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Alox12b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Alox12b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.