ephrin-A5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402127-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ephrin-A5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ephrin-A5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ephrin-A5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EFNA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ephrin-A5 Anticorpo (RR-7): sc-81945
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ephrin-A5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402127-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ephrin-A5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402127-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EFNA5 codifica a efrina-A5, um ligante ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) para as tirosina-quinases receptoras EphA, que medeia sinalização dependente de contato para coordenar o posicionamento celular, a formação de fronteiras e a orientação axonal. As interações efrina-A5–Eph regulam a remodelação do citoesqueleto e a dinâmica adesiva por meio de vias que envolvem GTPases da família Rho, sinalização de adesão focal e a internalização de complexos receptor–ligante dependente de endocitose. Em tecidos humanos, a efrina-A5 contribui para a montagem de circuitos neurais e pode influenciar a migração celular e programas de padronização tecidual que são frequentemente reprogramados em doenças. Alterações na sinalização EFNA5/EphA têm sido investigadas em contextos como fenótipos do neurodesenvolvimento e crescimento desregulado ou comportamento invasivo em modelos de câncer, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de vias de sinalização.
ephrin-A5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EFNA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EFNA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EFNA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EFNA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.