EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401722-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphA7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EphA7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPHA7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphA7 Anticorpo (E-7): sc-393973
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401722-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401722-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA7 codifica o EphA7, uma tirosina quinase receptora da família das efrinas (Eph) que medeia a comunicação célula–célula por meio da ligação a ligantes efrina-A ancorados à membrana. A sinalização de EphA7 coordena a orientação axonal, a padronização neuronal e cortical e a formação de limites teciduais ao regular a remodelação do citoesqueleto, a adesão e a migração direcional. Os efeitos a jusante intersectam-se com a sinalização de GTPases da família Rho e com cascatas de quinases que influenciam programas de proliferação e diferenciação. A atividade desregulada de EPHA7 e alterações no equilíbrio da via efrina/Eph foram relatadas em diversos contextos de doença, incluindo transtornos do neurodesenvolvimento e alterações associadas ao câncer na invasão e na organização/segregação celular.
EphA7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPHA7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPHA7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPHA7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPHA7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.