EphA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403104-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphA5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EphA5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPHA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphA5 Anticorpo (8B10B1): sc-517242
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403104-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403104-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPHA5 codifica o EphA5, um receptor tirosina-quinase do sistema de sinalização ephrin-A que regula a comunicação dependente de contato entre células vizinhas. O EphA5 modula o direcionamento axonal, a formação de sinapses e o refinamento de circuitos neuronais por meio de sinalização bidirecional, que afeta a remodelação do citoesqueleto, a adesão e o tráfego endocítico. Vias a jusante comumente associadas aos receptores Eph incluem as GTPases da família Rho, MAPK/ERK e nós de sinalização relacionados à PI3K, que integram pistas para migração e dinâmica de neuritos. Alterações na regulação de EPHA5 e desequilíbrios na via das efrinas têm sido associados a fenótipos do neurodesenvolvimento e a papéis dependentes do contexto em processos oncogênicos, como invasão e formação de fronteiras célula–célula, sustentando estudos mecanísticos tanto em modelos neurais quanto de câncer.
EphA5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPHA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPHA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPHA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPHA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.