EPCR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402158-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EPCRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EPCR (h) e o Plasmídeo Double Nickase EPCR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PROCR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EPCR Anticorpo (RCR-49): sc-53982
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EPCR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402158-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EPCR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402158-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PROCR codifica o receptor endotelial da proteína C (EPCR), uma glicoproteína de membrana do tipo I predominantemente expressa no endotélio vascular, que se liga à proteína C e à proteína C ativada para localizar a sinalização anticoagulante e citoprotetora na superfície celular. O EPCR coopera com a ativação da proteína C mediada por trombomodulina-trombina e dá suporte a vias dependentes de receptores ativados por proteases, que influenciam a função de barreira endotelial, a inflamação e o tráfego de leucócitos. Alterações na expressão do EPCR ou seu desprendimento (shedding) podem perturbar o equilíbrio hemostático e a homeostase vascular, vinculando a biologia de PROCR à trombose, a vasculopatias inflamatórias e à disfunção endotelial. Como receptor de superfície com interações ligante-receptor bem definidas, o EPCR também é usado como um indicador mecanístico da interrelação entre coagulação e inflamação em modelos celulares e vasculares.
EPCR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PROCR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PROCR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PROCR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PROCR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.