eotaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422835
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eotaxin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eotaxin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eotaxin Anticorpo (C-3): sc-373767
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eotaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422835 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ccl11 de camundongo codifica a eotaxina, uma quimiocina do tipo CC que promove o recrutamento seletivo de eosinófilos ao se ligar ao CCR3 e ao modular o tráfego de leucócitos em tecidos inflamados. A produção de eotaxina por células epiteliais, fibroblastos e células imunes favorece quimiotaxia, adesão e infiltração tecidual, integrando-se a redes de citocinas como a sinalização de IL-4/IL-13 e a programas inflamatórios regulados a jusante por MAPK e NF-κB. O Ccl11 é amplamente estudado em modelos de inflamação alérgica das vias aéreas, dermatite atópica e inflamação eosinofílica gastrointestinal, nos quais o acúmulo de eosinófilos contribui para remodelamento e disfunção da barreira. Além da alergia, alterações na sinalização Ccl11/eotaxina têm sido associadas à comunicação neuroimune e à inflamação relacionada ao envelhecimento, tornando-o relevante para estudos em nível de sistemas sobre patologia dirigida por quimiocinas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eotaxin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl11 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eotaxin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl11 para a investigação da sinalização de eotaxin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl11 críticos para a função eotaxin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eotaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo eotaxin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eotaxin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR eotaxin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.