eotaxin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422835

개요

마우스 Ccl11은 eotaxin을 암호화하는데, eotaxin은 CCR3에 결합하여 호산구를 선택적으로 모집하고 염증 조직에서 백혈구 이동(trafficking)을 조절하는 CC 케모카인이다. 상피세포, 섬유아세포, 면역세포에서 생성되는 eotaxin은 화학주성(chemotaxis), 부착(adhesion), 조직 침윤을 촉진하며, IL-4/IL-13 신호와 그 하위의 MAPK 및 NF-κB에 의해 조절되는 염증 프로그램 등 사이토카인 네트워크와 통합되어 작동한다. Ccl11은 알레르기성 기도 염증, 아토피 피부염, 위장관 호산구성 염증 모델에서 폭넓게 연구되어 왔으며, 이들 질환에서는 호산구 축적이 조직 재형성(remodeling)과 장벽 기능 장애에 기여한다. 알레르기 외에도 Ccl11/eotaxin 신호의 변화는 신경-면역 교차작용(neuroimmune crosstalk) 및 노화 연관 염증과도 연결되어, 케모카인 구동 병리를 시스템 수준에서 연구하는 데 관련성이 있다.

eotaxin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccl11 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccl11 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccl11의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 eotaxin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 eotaxin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccl11 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• eotaxin 기능에 중요한 Ccl11 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccl11 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• eotaxin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 eotaxin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccl11 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  eotaxin HDR 플라스미드 (m) 및 eotaxin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccl11 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccl11 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.