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ENX-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-417028-LAC | 200 µl | $455.00 |
EZH2 编码 ENX-1,它是多梳抑制复合体 2(PRC2)的催化亚基,可对组蛋白 H3 的第 27 位赖氨酸进行三甲基化(H3K27me3),从而建立转录抑制并促进染色质致密化。ENX-1 通过对谱系相关和细胞周期相关基因的表观遗传沉默,调控发育、干细胞身份、分化以及细胞记忆的维持。EZH2 的活性与 Polycomb/Trithorax 调控、染色质重塑相互衔接,并与 DNA 甲基化及信号通路发生串扰,共同塑造转录程序。由于其对基因表达状态具有广泛影响,EZH2 表达或功能失调常在肿瘤生物学、免疫调控以及神经发育过程中被重点研究。
ENX-1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 EZH2 表达。
ENX-1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在EZH2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ENX-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 EZH2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。