Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eNOS Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421929-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eNOSO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eNOS (m) e o Plasmídeo Double Nickase eNOS (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nos3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eNOS Anticorpo (A-9): sc-376751
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eNOS Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421929-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Nos3 de camundongo codifica a sintase do óxido nítrico endotelial (eNOS), uma enzima regulada por cálcio/calmodulina que gera óxido nítrico a partir de L-arginina para controlar o tônus vascular, as interações plaqueta–endotélio e a função de barreira endotelial. A atividade da eNOS é modulada por fosforilação e por interações proteína–proteína a jusante das vias de sinalização PI3K–AKT, VEGF e do estresse de cisalhamento, acoplando sinais metabólicos e inflamatórios à biodisponibilidade de óxido nítrico. A desregulação da sinalização dependente de Nos3 é amplamente implicada na disfunção endotelial e em alterações do equilíbrio redox, com relevância para hipertensão, aterosclerose, lesão por isquemia-reperfusão e remodelamento vascular inflamatório. Na pesquisa biomédica, o Nos3 serve como um nó central para estudar a sinalização óxido nítrico–cGMP, o estresse oxidativo e a comunicação entre células vasculares in vitro e in vivo.
eNOS O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nos3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nos3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nos3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nos3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.