Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Endothelin-3/EDN3/ET-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404436-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Endothelin-3/EDN3/ET-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Endothelin-3/EDN3/ET-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Endothelin-3/EDN3/ET-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EDN3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Endothelin-3/EDN3/ET-3 Anticorpo (5E8): sc-81944
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Endothelin-3/EDN3/ET-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404436-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Endothelin-3/EDN3/ET-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404436-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EDN3 codifica a endotelina-3 (ET-3), um ligante peptídico vasoativo secretado para receptores de endotelina, com sinalização proeminente através do EDNRB para regular a migração, a proliferação e a diferenciação de células da crista neural. A ET-3 aciona vias mediadas por GPCR, incluindo a sinalização PLCβ–IP3/Ca²⁺, a ativação de PKC e programas subsequentes de MAPK/ERK que influenciam o desenvolvimento de melanócitos e de neurônios entéricos. Em biologia do desenvolvimento, a atividade do eixo EDN3–EDNRB é central para a formação do sistema nervoso entérico e para a pigmentação, ligando alterações de sinalização a neurocristopatias congênitas. A desregulação da sinalização por endotelina também oferece uma base mecanística para estudar decisões de destino celular, padronização tecidual e comunicação com o microambiente em contextos relevantes para doenças.
Endothelin-3/EDN3/ET-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EDN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EDN3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EDN3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EDN3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.