ENC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406167
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ENC1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ENC1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ENC1 Anticorpo (7a): sc-517590
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ENC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406167 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ENC1 (ectodermal-neural cortex 1) codifica uma proteína de ligação à actina da família de repetições kelch, que conecta a remodelação do citoesqueleto a programas de diferenciação celular. Em células humanas, a ENC1 tem sido associada à regulação da dinâmica da actina, às respostas ao estresse oxidativo e ao controle dependente do contexto da proliferação e de características da linhagem neuronal, sustentando papéis no desenvolvimento e na manutenção do estado celular. Alterações na expressão de ENC1 foram relatadas em múltiplos tipos de tumores e em modelos de neurobiologia, tornando-a um nó útil para estudar vias que acoplam a sinalização redox, a organização do citoesqueleto e os outputs transcricionais. Essas propriedades posicionam a ENC1 como um alvo de pesquisa em estudos mecanísticos de diferenciação, adaptação ao estresse e fenótipos associados ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ENC1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ENC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ENC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ENC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ENC1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ENC1 para a investigação da sinalização de ENC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ENC1 críticos para a função ENC1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ENC1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ENC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ENC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ENC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ENC1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ENC1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ENC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ENC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.