Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ENA-78 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405834
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ENA-78 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ENA-78, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ENA-78 Anticorpo (YZ-14): sc-73931
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ENA-78 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405834 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CXCL5 codifica o peptídeo ativador de neutrófilos derivado do epitélio 78 (ENA-78), uma quimiocina CXC secretada por células epiteliais e estromais que direciona a quimiotaxia e a ativação de neutrófilos por meio da sinalização via CXCR2. O ENA-78 contribui para o recrutamento de células inflamatórias, para a modulação do comportamento endotelial e para a coordenação de respostas teciduais por vias ligadas a programas transcricionais regulados por MAPK e NF-κB. A expressão desregulada de CXCL5 tem sido associada a microambientes inflamatórios crônicos, tráfego leucocitário aberrante e inflamação associada a tumores em múltiplos contextos teciduais. Como mediador da sinalização imune inata, CXCL5 é frequentemente estudado em modelos de inflamação de mucosas, resposta a feridas e crosstalk entre redes de citocinas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ENA-78 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CXCL5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CXCL5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CXCL5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ENA-78.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CXCL5 para a investigação da sinalização de ENA-78, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CXCL5 críticos para a função ENA-78
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CXCL5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ENA-78 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ENA-78 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CXCL5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ENA-78 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ENA-78 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CXCL5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CXCL5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.