Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ENA-78 (h): sc-405834
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ENA-78 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ENA-78, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ENA-78 Antibody (YZ-14): sc-73931
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ENA-78 (h) | sc-405834 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CXCL5 code pour le peptide épithélial activant les neutrophiles 78 (ENA-78), une chimiokine CXC sécrétée par les cellules épithéliales et stromales, qui dirige la chimiotaxie et l’activation des neutrophiles via la signalisation de CXCR2. ENA-78 contribue au recrutement des cellules inflammatoires, à la modulation du comportement endothélial et à la coordination des réponses tissulaires au travers de voies liées à des programmes transcriptionnels régulés par MAPK et NF-κB. Une expression dérégulée de CXCL5 a été associée à des microenvironnements inflammatoires chroniques, à un trafic leucocytaire aberrant et à une inflammation associée aux tumeurs dans de multiples contextes tissulaires. En tant que médiateur de la signalisation de l’immunité innée, CXCL5 est fréquemment étudié dans des modèles d’inflammation des muqueuses, de réponse aux plaies et d’interactions au sein des réseaux de cytokines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ENA-78 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CXCL5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CXCL5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CXCL5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ENA-78.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CXCL5 pour l'étude de la signalisation de ENA-78, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CXCL5 essentiels à la fonction de ENA-78
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CXCL5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ENA-78 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ENA-78 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CXCL5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ENA-78 plasmide HDR (h) et le ENA-78 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CXCL5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CXCL5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.