EMMPRIN/CD147 Double Nickaseプラスミド (h): sc-400589-NIC

Basigin（BSG）は、EMMPRIN/CD147としても知られる高度に糖鎖修飾された免疫グロブリンスーパーファミリーの膜貫通タンパク質で、細胞-細胞間および細胞-細胞外マトリックス間の相互作用を組織化し、複数のシグナル伝達ネットワークを調節します。特に、マトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）の産生を促進して細胞外マトリックスのリモデリングを促すことでよく知られており、その下流で浸潤、血管新生応答、炎症性シグナル伝達に影響を及ぼします。CD147はまた、モノカルボン酸トランスポーター（例：MCT1/MCT4）のシャペロンとしても機能し、乳酸輸送を代謝リプログラミングや低酸素適応経路と結び付けます。BSG発現の制御異常は腫瘍進行、線維化、病原体と宿主細胞の相互作用と関連しており、微小環境のリモデリングや代謝カップリングを研究する上で中心的なノードとなっています。

EMMPRIN/CD147 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における BSG 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、BSG内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、BSGの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、BSGが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。