EML1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406445-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EML1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EML1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EML1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EML1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EML1 Anticorpo (B-3): sc-390841
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EML1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406445-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EML1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406445-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EML1 (proteína semelhante à proteína associada a microtúbulos de equinodermos 1) codifica uma proteína de ligação a microtúbulos que contribui para a organização e a estabilidade dos microtúbulos, dando suporte a processos como a função do fuso mitótico, o tráfego intracelular e o crescimento de neuritos. Por meio de sua interação com polímeros de tubulina e complexos associados a microtúbulos, a EML1 influencia a dinâmica do citoesqueleto necessária para a divisão celular e a migração neuronal. Alterações genéticas em EML1 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento, o que é consistente com um papel no desenvolvimento cortical e na morfogênese dependente de microtúbulos. Como regulador do citoesqueleto, a EML1 é um alvo útil para estudar como a arquitetura dos microtúbulos se integra ao controle do ciclo celular e às vias de polaridade.
EML1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EML1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EML1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EML1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EML1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.