Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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emerin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401048-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- emerinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase emerin (h) e o Plasmídeo Double Nickase emerin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EMD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:emerin Anticorpo (H-12): sc-25284
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
emerin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401048-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
emerin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401048-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O EMD codifica a emerin, uma proteína da membrana nuclear interna que se liga às laminas e a parceiros com domínio LEM para organizar a lâmina nuclear e conectar a cromatina à periferia do núcleo. A emerin participa do acoplamento nucleo-citosquelético por meio do complexo LINC, regula a mecanotransdução e influencia programas de transcrição envolvidos na diferenciação muscular e no controle do ciclo celular. A ruptura da arquitetura nuclear dependente de emerin está associada a alterações na estabilidade do genoma, sinalização aberrante e mudanças na mecânica celular. Variantes em EMD estão associadas à distrofia muscular de Emery–Dreifuss ligada ao X e a fenótipos relacionados de laminopatias, tornando-o um locus útil para estudar a biologia do envelope nuclear e a regulação gênica responsiva ao estresse.
emerin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EMD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EMD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EMD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EMD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.