Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Elongin A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404668
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Elongin A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Elongin A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Elongin A Anticorpo (A-5): sc-373811
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Elongin A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404668 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ELOA codifica a Elongin A, um componente central do complexo de alongamento da transcrição Elongin, que aumenta a processividade da RNA polimerase II e ajuda a coordenar a síntese produtiva de mRNA. A Elongin A também participa de complexos de ubiquitina ligase acoplados à transcrição, conectando o controle do alongamento à renovação de proteínas e às respostas ao estresse celular. Por meio dessas funções, ELOA influencia programas de expressão gênica que regulam a proliferação, as respostas a danos no DNA e a adaptação a condições de estresse proteotóxico. A desregulação do alongamento da transcrição e da regulação mediada por ubiquitina é uma característica recorrente em fenótipos de câncer e de neurodesenvolvimento, tornando ELOA um ponto útil para estudos mecanísticos dessas vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Elongin A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ELOA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ELOA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ELOA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Elongin A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ELOA para a investigação da sinalização de Elongin A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ELOA críticos para a função Elongin A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ELOA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Elongin A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Elongin A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ELOA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Elongin A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Elongin A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ELOA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ELOA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.