ELL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405835

概要

ELL3（eleven-nineteen lysine-rich leukemia gene 3）は、ELLファミリーに関連する転写伸長因子様タンパク質をコードしており、RNAポリメラーゼIIと相互作用して、生産的な伸長および転写産物量に影響を与えます。他のELLパラログに比べて解析は十分に進んでいないものの、ELL3は転写ダイナミクスの調節を通じて、細胞アイデンティティ、分化、発生タイミングに関連する遺伝子発現プログラムの制御に関与すると考えられています。伸長制御やRNAプロセシングの異常は、がん化や発生制御の破綻で繰り返し見られる特徴であり、ELL3は転写機構が異常な遺伝子発現にどのように寄与するかを研究する上で重要な標的となります。ヒト細胞においてELL3の機能を解析することは、状況依存的な転写制御と、疾患関連の発現シグネチャーとの潜在的なつながりを明らかにする手がかりとなります。

ELL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるELL3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ELL3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ELL3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ELL3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ELL3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ELL3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ELL3の機能に不可欠なELL3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ELL3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ELL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびELL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ELL3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ELL3 HDRプラスミド（h）および ELL3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはELL3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のELL3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。