Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
elastin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400640-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- elastin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico elastin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:elastin Anticorpo (E-11): sc-166543
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
elastin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400640-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene humano **ELN** codifica a elastina, uma proteína da matriz extracelular altamente reticulada que confere elasticidade e capacidade de retorno elástico às fibras elásticas em artérias, pulmão e pele. A montagem da elastina envolve arcabouços microfibrilares e reticulação mediada pela lisil oxidase, sustentando a complacência vascular e a mecânica dos tecidos e influenciando o comportamento celular por meio da sinalização matriz–integrina e de vias de mecanotransdução. A desregulação de **ELN** compromete a formação de fibras elásticas e a homeostase da matriz extracelular, alterando o fenótipo de células musculares lisas e a organização do tecido conjuntivo. A disfunção de **ELN** está associada a distúrbios da integridade vascular e do tecido conjuntivo, incluindo estenose aórtica supravalvar, cutis laxa e outras arteriopatias relacionadas à elastina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO elastin (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ELN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ELN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ELN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína elastin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ELN para a investigação da sinalização de elastin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ELN críticos para a função elastin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ELN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo elastin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo elastin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ELN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo elastin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR elastin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ELN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ELN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.