Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
eIF4AII Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402758-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4AIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF4AII (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF4AII (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF4A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF4AII Anticorpo (H-5): sc-137148
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4AII Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402758-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4AII Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402758-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A2 codifica a eIF4AII, uma helicase de RNA da família DEAD-box que atua no complexo de iniciação da tradução eIF4F para desenrolar UTRs 5′ estruturadas e promover o carregamento do ribossomo. Ao regular a tradução dependente de cap, a eIF4AII influencia a produção do proteoma durante o crescimento, as respostas ao estresse e a progressão do ciclo celular, e se conecta a vias do metabolismo de RNA que controlam a estabilidade do mRNA e a eficiência translacional. O controle alterado da iniciação da tradução está associado a sinalização desregulada e à proteostase, tornando o EIF4A2 um ponto útil para estudar programas de tradução oncogênicos e vulnerabilidades dependentes de RNA. A atividade da eIF4AII também é relevante em contextos nos quais a tradução seletiva de transcritos estruturados molda a diferenciação e a expressão gênica adaptativa ao estresse.
eIF4AII O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF4A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF4A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF4A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF4A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.