EIF2D Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405379-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EIF2DO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EIF2D (h) e o Plasmídeo Double Nickase EIF2D (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF2D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF2D Anticorpo (2D10): sc-293396
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EIF2D Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405379-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EIF2D Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405379-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2D codifica o fator de iniciação da tradução eucariótica 2D, um fator de iniciação não canônico implicado na iniciação alternativa da tradução e no fornecimento de tRNA ao sítio P do ribossomo em contextos celulares específicos. Por meio do seu papel no controle traducional, o EIF2D se conecta a vias que regulam a proteostase e respostas adaptativas ao estresse celular, incluindo módulos ligados à sinalização de eIF2 e à dinâmica da resposta integrada ao estresse. A perturbação da iniciação da tradução e da síntese proteica adaptativa ao estresse é amplamente relevante para mecanismos estudados em neurodegeneração, plasticidade de células tumorais e modelos de infecção viral, nos quais programas traducionais alterados podem remodelar transições de estado celular. Como resultado, o EIF2D é frequentemente investigado para entender como mudanças no uso de fatores de iniciação influenciam a tradução específica de mRNAs e fenótipos a jusante.
EIF2D O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF2D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF2D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF2D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF2D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.