Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF2Bα Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-404034-ACT
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF2BαO plasmídeo de ativação de CRISPR (h)e um mediador da ativação sinergética (SAM) dentro do sistema de ativada da transcrição, criado para a especificamente fazer a regulação genética crescente
- eIF2Bα Plasmídeo de ativação CRISPR (h) consiste em 3 pares de plasmídeos com a razão de massa de 1:1:1: um plasmídeo contento o código para Cas9 desativada
- O complexo SAM resultante se liga a uma região especifica a qual contem aproximadamente 200-250 nt na região upstream da região de inicio da transcrição e fornece um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética.
- Os gRNAs codificados pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR eIF2Bα (h) e pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR eIF2Bα (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas a montante do local de início da transcrição de EIF2B1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF2Bα Anticorpo (C-11): sc-376846
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF2Bα Plasmídeo de ativação de CRISPR (h) | sc-404034-ACT | 20 µg | $397.00 |
EIF2B1 codifica a subunidade regulatória eIF2Bα do fator eucariótico de iniciação da tradução 2B (eIF2B), um fator de troca de nucleotídeos de guanina que reativa o eIF2 ao catalisar a troca de GDP por GTP. O eIF2B integra sinais da resposta integrada ao estresse (ISR), conectando a fosforilação de eIF2α à atenuação global da tradução e à tradução seletiva de mRNAs responsivos ao estresse durante estresse do retículo endoplasmático (RE), limitação de nutrientes e desafio viral. Ao controlar as taxas de iniciação da tradução, o eIF2Bα influencia a proteostase, decisões de sobrevivência celular e adaptação metabólica. A desregulação da atividade do eIF2B está associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, incluindo leucodistrofias relacionadas ao EIF2B, tornando o EIF2B1 um alvo valioso para estudar sinalização de estresse e controle translacional em células humanas.
eIF2Bα O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de EIF2B1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.
eIF2Bα O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus EIF2B1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição EIF2B1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de eIF2Bα. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus EIF2B1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de eIF2Bα no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via eIF2Bα em células tumorais com expressão de EIF2B1 silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.