EHHADH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404068-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EHHADHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EHHADH (h) e o Plasmídeo Double Nickase EHHADH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EHHADH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EHHADH Anticorpo (D-2): sc-393123
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EHHADH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404068-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EHHADH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404068-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EHHADH codifica a enoil‑CoA hidratase/3‑hidroxiacil‑CoA desidrogenase, uma enzima peroxissomal bifuncional que catalisa etapas sequenciais da β‑oxidação de ácidos graxos, particularmente de substratos de cadeia muito longa e de cadeia ramificada. Ao sustentar o catabolismo lipídico peroxissomal e o equilíbrio redox, a EHHADH influencia a homeostase energética celular e vias de sinalização lipídica que se cruzam com o metabolismo mitocondrial. Alterações na expressão ou na atividade de EHHADH têm sido associadas à desregulação metabólica no fígado e nos rins, e são frequentemente estudadas em contextos como distúrbios relacionados a peroxissomos, esteatose e modelos de lesão renal.
EHHADH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EHHADH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EHHADH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EHHADH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EHHADH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.