EGFL6 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-411850-LAC

EGFL6 codifica uma proteína secretada associada à matriz extracelular, pertencente à família EGF-like, que contribui para as interações célula–matriz e para a sinalização do microambiente. A EGFL6 tem sido associada à regulação do comportamento de células endoteliais e epiteliais, incluindo migração, adesão e sobrevivência, em linha com funções em remodelação tecidual e processos ligados à angiogênese. Por meio dos seus domínios tipo EGF, a EGFL6 pode modular redes de sinalização que se cruzam com vias mediadas por integrinas e com programas responsivos a fatores de crescimento, influenciando a dinâmica do citoesqueleto. A expressão desregulada de EGFL6 foi relatada em múltiplos contextos de doença, sustentando o seu uso como ferramenta molecular para estudar a remodelação vascular, a biologia do microambiente tumoral e fenótipos de motilidade celular em sistemas modelo humanos.

As Partículas de Ativação Lentivirais EGFL6 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de EGFL6 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais EGFL6 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição EGFL6, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de EGFL6. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo EGFL6 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.