Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Eg5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402276-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Eg5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Eg5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Eg5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para . Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Eg5 Anticorpo (F-1): sc-374212
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Eg5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402276-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Eg5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402276-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Eg5, codificada pelo gene humano KIF11, é uma cinesina mitótica essencial para a montagem do fuso bipolar e a separação dos centrossomos durante a divisão celular. Ao fazer a ligação cruzada e o deslizamento de microtúbulos antiparalelos, a Eg5 promove a separação dos polos do fuso e sustenta a congressão e a segregação cromossômicas precisas. Sua atividade integra-se ao controle do checkpoint de montagem do fuso e à dinâmica dos microtúbulos para manter a estabilidade do genoma. A função ou a expressão desregulada de Eg5 está associada a mitose aberrante, aneuploidia e fenótipos proliferativos relevantes para a biologia do câncer e a pesquisa em instabilidade cromossômica.
Eg5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de . Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função . Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.