ECM29 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409848-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ECM29O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ECM29 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ECM29 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KIAA0368. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ECM29 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409848-NIC | 20 µg | $410.00 |
KIAA0368 codifica a ECM29, uma grande proteína de andaime que se associa ao proteassoma 26S e ajuda a coordenar a montagem, a localização e o controle de qualidade do proteassoma. Ao modular a dinâmica do proteassoma, a ECM29 influencia a degradação de proteínas dependente de ubiquitina e se conecta a vias de proteostase que regulam a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a sinalização de estresse. Alterações na regulação do proteassoma têm sido associadas à degradação desregulada de proteínas-chave de sinalização e a perturbações mais amplas da homeostase celular relevantes para a biologia do câncer e a pesquisa em neurodegeneração. Como resultado, a ECM29 é comumente estudada em contextos em que a função do proteassoma, a ubiquitinação e a adaptação celular ao estresse são variáveis experimentais centrais.
ECM29 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KIAA0368 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KIAA0368. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KIAA0368. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KIAA0368 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.