Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401367-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MAPRE1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EB1 Anticorpo (1A11/4): sc-47704
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPRE1 codifica a proteína 1 ligante das extremidades (EB1), uma proteína central que rastreia a extremidade “plus” dos microtúbulos e reconhece a capa de tubulina ligada a GTP, coordenando o crescimento e a estabilização dos microtúbulos. A EB1 atua como um andaime para redes de +TIPs, conectando microtúbulos dinâmicos aos cinetócoros e ao córtex celular para sustentar a montagem do fuso, a segregação cromossômica e a migração celular direcionada. Por meio de interações com APC, proteínas CLIP e reguladores de dineína/dinactina, a EB1 integra a dinâmica dos microtúbulos à progressão mitótica e às vias de polaridade celular. A desregulação da função e da expressão de MAPRE1/EB1 tem sido associada a alterações na estabilidade cromossômica e à remodelação do citoesqueleto observadas em estudos de biologia celular relacionados ao câncer.
EB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MAPRE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MAPRE1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MAPRE1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MAPRE1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.