Dynein IC1, axonemal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411947

Visão geral

DNAI1 codifica a cadeia intermediária 1 da dineína, um componente da dineína axonemal necessário para a montagem e a transmissão de força dentro dos braços externos de dineína, que impulsionam o batimento dos cílios móveis e dos flagelos. Ao acoplar a atividade motora da dineína movida por ATP aos dupletos de microtúbulos, a Dineína IC1 (axonemal) contribui para a geração coordenada da forma de onda ciliar e para os processos de depuração mucociliar. A função de DNAI1 interage com vias que regulam a biogênese dos cílios, a organização do axonema e a manutenção da estrutura dos cílios móveis dependente do transporte intraflagelar. A disrupção de DNAI1 está associada à discinesia ciliar primária, ligando a integridade alterada da dineína axonemal ao comprometimento da motilidade ciliar e a fenótipos respiratórios e do desenvolvimento subsequentes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dynein IC1, axonemal (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNAI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNAI1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNAI1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dynein IC1, axonemal.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNAI1 para a investigação da sinalização de Dynein IC1, axonemal, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNAI1 críticos para a função Dynein IC1, axonemal
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNAI1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Dynein IC1, axonemal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Dynein IC1, axonemal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNAI1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Dynein IC1, axonemal Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Dynein IC1, axonemal (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNAI1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNAI1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.