Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420081

Visão geral

O gene murino Dvl2 codifica a Dishevelled 2 (DVL2), uma proteína citoplasmática do tipo “scaffold” que transmite sinais dos receptores Frizzled para as vias Wnt a jusante. A DVL2 integra a sinalização Wnt canônica/β-catenina com as cascatas não canônicas de polaridade celular planar (PCP) e Wnt/Ca²⁺, coordenando complexos próximos ao receptor e regulando a dinâmica do citoesqueleto, a polaridade e o tráfego intracelular. Por meio dessas funções, a DVL2 contribui para o padrão embrionário, o comportamento de células-tronco/progenitoras e a homeostase tecidual, e sua desregulação é frequentemente investigada em contextos de sinalização Wnt aberrante associada a defeitos do desenvolvimento e a programas de sinalização oncogênicos. Dvl2 também é estudado pelos efeitos sobre migração celular e morfogênese, em que o equilíbrio entre a transcrição dependente de β-catenina e as saídas de PCP é fundamental.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Dvl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Dvl2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Dvl2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Dvl2 para a investigação da sinalização de Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Dvl2 críticos para a função Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Dvl2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Dvl2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Dvl2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Dvl2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.