DTX3L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403953-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DTX3LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DTX3L (h) e o Plasmídeo Double Nickase DTX3L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DTX3L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DTX3L Anticorpo (D-10): sc-514776
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DTX3L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DTX3L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (deltex ligase E3 de ubiquitina 3L) codifica uma ligase E3 de ubiquitina que coopera com a PARP9 para regular a ubiquitinação de proteínas em resposta à sinalização por interferon e ao estresse celular. Por meio da modulação do turnover proteico dependente de ubiquitina e de processos associados a dano no DNA, a DTX3L influencia vias da imunidade inata, sinalização ligada à cromatina e a manutenção da integridade do genoma. Sua atividade tem sido associada à regulação de programas transcricionais inflamatórios e de respostas à infecção viral, tornando-a relevante para estudos de homeostase imune. Alterações na expressão de DTX3L ou no engajamento de suas vias foram relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo sinalização associada ao câncer e desregulação imune, apoiando investigações mecanísticas em modelos de células humanas.
DTX3L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DTX3L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DTX3L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DTX3L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DTX3L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.