DSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404696-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DSC3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DSC3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DSC3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DSC3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DSC3 Anticorpo (93-71): sc-81806
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano DSC3 codifica a desmocolina-3, uma caderina dependente de cálcio que forma o núcleo adesivo dos desmossomos em epitélios estratificados. O DSC3 atua em cooperação com desmogleínas e proteínas citoplasmáticas da placa para conectar filamentos intermediários e manter a integridade tecidual, contribuindo para vias que regulam a montagem de junções célula–célula, a diferenciação epitelial e as respostas ao estresse mecânico. A alteração na expressão de DSC3 ou a disfunção desmossomal tem sido associada ao comprometimento da função de barreira, a mudanças na coesão e motilidade celulares e a fenótipos de doenças epiteliais, incluindo progressão relacionada ao câncer e distúrbios inflamatórios da pele. Como os desmossomos fazem interface com a remodelação do citoesqueleto e com redes de sinalização, o DSC3 é frequentemente estudado na biologia de junções, na homeostase epitelial e na regulação da expressão gênica dependente de adesão.
DSC3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DSC3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DSC3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DSC3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DSC3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.