Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401002-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DR5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DR5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DR5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TNFRSF10B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DR5 Anticorpo (D-6): sc-166624
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401002-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DR5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401002-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF10B codifica o receptor de morte 5 (DR5), um membro de superfície celular da superfamília de receptores de TNF que transmite sinalização apoptótica quando ativado por TRAIL. A ativação do receptor promove a montagem do DISC com FADD e caspases iniciadoras, conectando a apoptose extrínseca à amplificação mitocondrial e a programas mais amplos de resposta ao estresse. A sinalização de DR5 interage com as vias de NF-κB e MAPK, modulando respostas inflamatórias e de sobrevivência de modo dependente do contexto. Alterações na expressão de DR5 ou no acoplamento de sua via são frequentemente estudadas em câncer e imunobiologia como determinantes da sensibilidade à apoptose, de decisões de destino celular e das interações entre tumor e microambiente.
DR5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TNFRSF10B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TNFRSF10B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TNFRSF10B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TNFRSF10B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.