Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DnaJA4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406743
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DnaJA4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DnaJA4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DnaJA4 Anticorpo (LL2): sc-100714
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DnaJA4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406743 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNAJA4 codifica a DnaJA4, um membro da família de cochaperonas Hsp40 (DnaJ) que se liga a proteínas clientes desenoveladas e estimula a atividade ATPase da Hsp70 para promover o dobramento adequado, o redobramento e a triagem de proteínas mal dobradas. Por meio desses processos de controle de qualidade mediados por chaperonas, a DnaJA4 contribui para redes de proteostase que se cruzam com respostas celulares ao estresse e vias de renovação/degradação proteica. A atividade de chaperonas desregulada pode influenciar a estabilidade e a função de proteínas de sinalização, impactando vias que governam a sobrevivência celular, a diferenciação e a adaptação ao estresse. A capacidade de proteostase alterada é amplamente relevante para a biologia de doenças, inclusive em contextos nos quais dobramento proteico aberrante, agregação ou sinalização de estresse sustentam fenótipos patológicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DnaJA4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNAJA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNAJA4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNAJA4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DnaJA4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNAJA4 para a investigação da sinalização de DnaJA4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNAJA4 críticos para a função DnaJA4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNAJA4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DnaJA4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DnaJA4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNAJA4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DnaJA4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DnaJA4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNAJA4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNAJA4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.