Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DNA Ligase I双切口酶质粒(h): sc-402830-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DNA Ligase I 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DNA Ligase I双切酶质粒（h）和DNA Ligase I双切酶质粒（h2）编码针对LIG1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DNA Ligase I: sc-271678，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DNA Ligase I双切口酶质粒(h) | sc-402830-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA Ligase I双切口酶质粒(h2) | sc-402830-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **LIG1** 基因编码 **DNA连接酶I**（DNA ligase I），这是一种 ATP 依赖性连接酶，主要在滞后链合成过程中通过连接冈崎片段来封闭单链断裂，并完成与修复相关的 DNA 切口连接。DNA连接酶I 位于 DNA复制与多条 DNA修复通路的交汇处发挥作用，包括长片段碱基切除修复（long-patch BER），以及在 DNA损伤加工过程中产生的 DNA链不连续结构的处理与消除。LIG1 的正常活性有助于维持基因组稳定性、促进复制叉推进并保证细胞周期的准确性；其功能受损与复制应激升高及突变发生增加有关。连接能力的改变被认为与癌症生物学相关的基因组不稳定表型以及遗传性 DNA修复缺陷综合征有关，因此 LIG1 是研究 DNA维护机制的一个有价值的关键节点。
DNA Ligase I 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 LIG1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LIG1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏LIG1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了LIG1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。