DMRT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424507
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DMRT1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DMRT1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DMRT1 Anticorpo (A-9): sc-377167
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DMRT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424507 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Dmrt1 codifica a DMRT1, um fator de transcrição conservado que contém um domínio de ligação ao DNA do tipo DM e que regula programas de determinação e diferenciação sexual na gônada de camundongos. DMRT1 é essencial para a manutenção pós-natal do testículo, promovendo a identidade das células de Sertoli, coordenando o desenvolvimento das células germinativas e reprimindo a ativação inadequada de vias ovarianas, incluindo o antagonismo de redes conduzidas por FOXL2. Sua atividade se integra ao controle transcricional e baseado em cromatina da meiose, da diferenciação de espermatogônias e da sinalização entre linhagens somáticas e germinativas no epitélio seminífero. A ruptura ou desregulação de programas associados a DMRT1 está ligada a distúrbios do desenvolvimento sexual, espermatogênese prejudicada e disgenesia gonadal, tornando-o um nó-chave para estudos mecanísticos da biologia reprodutiva.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DMRT1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Dmrt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Dmrt1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Dmrt1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DMRT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Dmrt1 para a investigação da sinalização de DMRT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Dmrt1 críticos para a função DMRT1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Dmrt1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DMRT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DMRT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Dmrt1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DMRT1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DMRT1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Dmrt1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Dmrt1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.