Dlx-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405063

概要

DLX3は、ホメオボックス型転写因子Dlx-3をコードしており、DNA結合性の転写制御因子として、外胚葉および神経堤由来の系譜プログラム（表皮分化、毛包形成、歯の発生（歯原性）、頭蓋顔面の発生など）に不可欠である。Dlx-3は、細胞運命の決定、組織パターニング、終末分化を協調させる転写ネットワークを調節し、BMPやWnt依存的な遺伝子制御回路など、より広範な発生シグナル伝達軸とも相互作用する。ヒトではDLX3機能の変化が外胚葉付属器や頭蓋顔面構造の異常と関連しており、これは上皮—間葉相互作用における同因子の役割を反映している。転写調節因子としてDlx-3は、系譜コミットメント、バリア形成、分化に伴う転写プログラムを研究する上で扱いやすい解析ポイントとなる。

Dlx-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDLX3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DLX3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DLX3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Dlx-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Dlx-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DLX3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Dlx-3の機能に不可欠なDLX3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DLX3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Dlx-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDlx-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DLX3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Dlx-3 HDRプラスミド（h）および Dlx-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDLX3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDLX3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。