Dlx-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405307-NIC

DLX1 codifica o fator de transcrição homeobox Dlx-1, um regulador nuclear essencial para o estabelecimento de padrões embrionários e a especificação de linhagens celulares, particularmente em estruturas craniofaciais e no desenvolvimento de interneurônios do prosencéfalo. O Dlx-1 modula programas gênicos que controlam a diferenciação, migração e maturação de progenitores neurais e derivados do ectoderma, por meio de ligação ao DNA específica de sequência e cooperação com outros fatores de transcrição do desenvolvimento. Em contextos adultos e de doença, alterações na expressão de DLX1 têm sido associadas a transições desreguladas de estados celulares e a redes transcricionais aberrantes relatadas em cânceres e transtornos do neurodesenvolvimento, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de regulação gênica. Assim, DLX1 é amplamente estudado por sua contribuição para cascatas de expressão gênica do desenvolvimento e para a remodelação dependente do contexto da identidade celular.

Dlx-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DLX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DLX1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DLX1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DLX1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.