DLD慢病毒激活颗粒(h): sc-403207-LAC

人类 DLD 基因编码二氢硫辛酰胺脱氢酶，这是一种线粒体内依赖 FAD 的氧化还原酶，负责将被还原的硫辛酰胺再生为氧化型硫辛酰胺，从而维持多个脱氢酶复合体的催化循环。作为丙酮酸脱氢酶（PDH）、α‑酮戊二酸脱氢酶以及支链 α‑酮酸脱氢酶共同的 E3 亚基，DLD 通过产生 NADH，将糖酵解碳源进入与 TCA 循环通量、氨基酸分解代谢以及氧化还原稳态联系起来。DLD 的活性参与线粒体能量代谢与活性氧（ROS）平衡，并与塑造代谢应激反应的多条通路相连接。DLD 的遗传或功能扰动与线粒体代谢性疾病及细胞生物能改变相关，支持其用于研究神经代谢表型和线粒体功能障碍机制。

DLD 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DLD 表达。

DLD 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在DLD转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性DLD表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 DLD 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。