DICE1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421932
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DICE1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DICE1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DICE1 Anticorpo (H-6): sc-376524
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DICE1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421932 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ints6 codifica DICE1, um componente conservado do complexo Integrator que se associa à RNA polimerase II para coordenar o processamento da extremidade 3′ de pequenos RNAs nucleares e um controle transcricional mais amplo. Por meio de suas funções na maturação de RNA e na regulação da transcrição, DICE1 influencia a progressão do ciclo celular, a diferenciação e programas de expressão gênica em todo o genoma. Alterações na atividade de INTS6/DICE1 têm sido associadas à desregulação do controle de crescimento e a contextos de sinalização oncogênica, tornando-a relevante para o estudo de mecanismos de supressão tumoral e de estresse transcricional. Em sistemas murinos, a perturbação de Ints6 é útil para dissecar vias dependentes de Integrator que acoplam o processamento de RNA a efeitos sobre a cromatina e a saídas de sinalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DICE1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ints6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ints6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ints6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DICE1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ints6 para a investigação da sinalização de DICE1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ints6 críticos para a função DICE1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ints6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DICE1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DICE1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ints6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DICE1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DICE1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ints6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ints6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.