Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dia 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403238
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dia 2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Dia 2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dia 2 Anticorpo (H-3): sc-393489
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dia 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403238 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DIAPH2 (Dia 2) codifica uma formina relacionada às diaphanous que regula a nucleação e o alongamento de filamentos de actina a jusante da sinalização por GTPases da família Rho. Por meio do seu papel na remodelação do citoesqueleto, DIAPH2 contribui para o controle da forma celular, a dinâmica de adesão e a migração dirigida, processos intimamente ligados à citocinese e à manutenção da polaridade celular. Alterações na organização da actina dependente de forminas podem perturbar o posicionamento do fuso e a estabilidade do genoma, conectando vias associadas a DIAPH2 a fenótipos proliferativos e de desenvolvimento. DIAPH2 também tem sido estudado em contextos nos quais a desregulação do citoesqueleto é relevante para a biologia reprodutiva e para o comportamento celular oncogênico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dia 2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DIAPH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DIAPH2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DIAPH2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dia 2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DIAPH2 para a investigação da sinalização de Dia 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DIAPH2 críticos para a função Dia 2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DIAPH2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Dia 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Dia 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DIAPH2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Dia 2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Dia 2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DIAPH2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DIAPH2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.