DHRS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411259

Visão geral

DHRS3 (desidrogenase/redutase 3) codifica uma desidrogenase/redutase de cadeia curta dependente de NADPH que catalisa a redução de retinaldeído a retinol, ajudando a regular a homeostase intracelular de retinoides. Ao limitar a disponibilidade de retinal para oxidação a ácido retinoico, a DHRS3 modula programas de sinalização do ácido retinoico que influenciam a diferenciação, o desenvolvimento embrionário, a biologia epitelial e a adaptação metabólica. A expressão de DHRS3 responde a retinoides e integra-se com processos de armazenamento de retinol e relacionados ao estresse oxidativo por meio do controle do fluxo de aldeídos reativos. A desregulação do metabolismo de retinoides e a atividade alterada de DHRS3 têm sido associadas a anomalias do desenvolvimento e a alterações relacionadas ao câncer em estados de diferenciação, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados por retinoides.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DHRS3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DHRS3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DHRS3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DHRS3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DHRS3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DHRS3 para a investigação da sinalização de DHRS3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DHRS3 críticos para a função DHRS3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DHRS3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DHRS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DHRS3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DHRS3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DHRS3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DHRS3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DHRS3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DHRS3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.