DHCR24 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405507-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DHCR24O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DHCR24 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DHCR24 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DHCR24. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DHCR24 Anticorpo (A-4): sc-398938
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DHCR24 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405507-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHCR24 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405507-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHCR24 codifica a 24-desidrocolesterol redutase, uma enzima do retículo endoplasmático que catalisa a etapa terminal da biossíntese do colesterol ao reduzir o desmosterol a colesterol. Por meio do seu papel na via de Bloch, a DHCR24 influencia a composição de esteróis de membrana, a organização de lipid rafts e redes de sinalização sensíveis a esteróis que se cruzam com a homeostase do RE e com respostas ao estresse oxidativo. A perturbação da atividade de DHCR24 pode alterar o equilíbrio desmosterol/colesterol, impactando a diferenciação celular e a adaptação metabólica em contextos dependentes de esteróis. Alterações na expressão ou na função de DHCR24 foram relatadas em distúrbios do metabolismo do colesterol e têm sido estudadas em modelos de neurodegeneração e oncologia por suas ligações com a resiliência ao estresse e com a remodelação lipídica.
DHCR24 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DHCR24 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DHCR24. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DHCR24. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DHCR24 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.