Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DGUOK Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407916
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DGUOK Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico DGUOK, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DGUOK Antibody (H-3): sc-376267
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DGUOK Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-407916 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
La deossiguanosina chinasi (DGUOK) è una deossiribonucleoside chinasi mitocondriale che catalizza la fosforilazione dei deossiribonucleosidi purinici, sostenendo il pool mitocondriale di deossinucleotidi necessario per la replicazione e la riparazione del DNA mitocondriale (mtDNA). Agisce nelle vie mitocondriali di recupero (salvage) dei nucleotidi e contribuisce al mantenimento del genoma, alla capacità di fosforilazione ossidativa e all’omeostasi bioenergetica cellulare. Un’alterata attività di DGUOK è associata a fenotipi di deplezione del DNA mitocondriale e a una funzionalità mitocondriale compromessa, rendendola rilevante per studi sui disturbi mitocondriali, sulle sindromi epatocerebrali e sui difetti del metabolismo energetico nelle cellule umane.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DGUOK in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DGUOK insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DGUOK a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina DGUOK.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DGUOK per lo studio della segnalazione di DGUOK, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni DGUOK critici per la funzione di DGUOK
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DGUOK per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal DGUOK CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal DGUOK CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DGUOK. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal DGUOK Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR DGUOK (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DGUOK per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DGUOK definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.