Desmuslin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409241-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DesmuslinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Desmuslin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Desmuslin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SYNM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Desmuslin Anticorpo (A-8): sc-374484
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Desmuslin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Desmuslin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYNM codifica a desmuslina, uma proteína associada a filamentos intermediários, enriquecida no músculo estriado, onde ajuda a organizar a rede do citoesqueleto e a manter a integridade estrutural nos discos Z e nos costâmeros. A desmuslina participa de vias que regulam a ancoragem do citoesqueleto, a mecanotransdução e a transmissão de força, ao conectar sistemas de filamentos a complexos associados à membrana. A desregulação de SYNM tem sido associada à desorganização miofibrilar e à alteração da estabilidade das fibras musculares, tornando-o relevante para o estudo de respostas ao estresse dependentes do citoesqueleto. Como um componente do tipo “andaime” da arquitetura muscular, a desmuslina é frequentemente investigada em modelos de cardiomiopatia e miopatia esquelética para compreender como as redes de filamentos intermediários preservam a resiliência celular.
Desmuslin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SYNM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SYNM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SYNM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SYNM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.