Derlin-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413887-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Derlin-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Derlin-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Derlin-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DERL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Derlin-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Derlin-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-413887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DERL3 codifica a Derlin-3, um componente de membrana do retículo endoplasmático (RE) da maquinaria de degradação associada ao RE (ERAD), que ajuda a reconhecer e retrotranslocar proteínas luminais mal dobradas para ubiquitinação no citosol e eliminação pelo proteassoma. Ao sustentar o controlo de qualidade proteico, a Derlin-3 contribui para a manutenção da homeostase do RE e para a modulação da sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) durante o stress proteotóxico. Alterações na expressão de DERL3 ou na sua regulação epigenética foram relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo o cancro, em que perturbações na ERAD e na adaptação ao stress do RE podem influenciar programas de sobrevivência celular. Assim, DERL3 é um alvo útil para dissecar como a proteostase do RE se cruza com a função da via secretora, a sinalização de stress e a aptidão celular.
Derlin-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DERL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DERL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DERL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DERL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.